液相色譜法:特指一種用液體為流動相的色譜分離分析方法。它在經(jīng)典色譜理論的基礎(chǔ)上,采用了高壓泵、化學(xué)鍵合固定相分離柱、高靈敏檢測器等新實驗技術(shù)建立的一種液相色譜分析法。
高壓:150-350*105Pa
:大于30000塔板/米
高靈敏:10-9g(紫外檢測)、10-11g(熒光檢測)
液相色譜儀與氣相色譜儀的區(qū)別:
1.分析對象的區(qū)別
GC:適于能氣化、熱穩(wěn)定性好、且沸點較
低的樣品;但對高沸點、揮發(fā)性差、
熱穩(wěn)定性差、離子型及高聚物的樣
品,尤其對大多數(shù)生化樣品不可檢測
占有機物的20%
HPLC:適于溶解后能制成溶液的樣品(包括
有機介質(zhì)溶液),不受樣品揮發(fā)性和
熱穩(wěn)定性的限制,對分子量大、難
氣化、熱穩(wěn)定性差的生化樣品及高分
子和離子型樣品均可檢測
用途廣泛,占有機物的80%
2.流動相差別的區(qū)別
GC:流動相為惰性,氣體組分與流動相無親合作用力,只與固定相有相互作用。
HPLC:流動相為液體,流動相與組分間有親合作用力,能提高柱的選擇性、改善分離度,對分離起
正向作用。且流動相種類較多,選擇余地廣,改變流動相極性和pH值也對分離起到調(diào)控作用,當(dāng)
選用不同比例的兩種或兩種以上液體作為流動相也可以增大分離選擇性。
3.操作條件差別
GC:加溫操作
HPLC:室溫;高壓(液體粘度大,峰展寬?。?/div>